Набор реагентов «Bursaphelenchus xylophilus-РВ»
Кат. № PH-102
Bursaphelenchus xylophilus (Steiner & Buhrer) Nickle, или сосновая стволовая нематода - опасный вредитель хвойных пород деревьев, включена в Перечень ЕОКЗР A2 вредных организмов, рекомендуемых к регулированию.
Предположительно B. xylophilus впервые обнаружена в Северной Америке, откуда в начале XX века была завезена в Японию (остров Кюсю) с зараженной древесиной. Из Японии B. xylophilus распространилась в другие страны Азии (Li et al., 1983), а в конце XX века и в Европу: Португалия (материковая часть и остров Мадейра) и Испания (отдельные вспышки) (Mota et al., 1999; Abelleira et al., 2011; Fonseca et al., 2012). В настоящее время присутствует в следующих странах: Португалия, Испания, Китай, Япония, Республика Корея, Тайвань, Канада, США, Мексика.
Жизненный цикл B. xylophilus включает несколько этапов: яйцо, четыре ювенильные стадии и взрослая нематода, при этом может протекать в фитофагической фазе (нематоды питаются клетками здоровых деревьев) и в фазе микофагии (нематоды питаются грибами).
Растениями-хозяевами сосновой нематоды являются различные породы хвойных деревьев. B. xylophilus встречается в основном на Pinus spp.: P. bungeana, P. densiflora, P. luchuensis, P. massoniana and P. thunbergia, P. mugo, P. nigra, P. sylvestris, P. pinaster. Также к числу восприимчивых растений относятся Abies, Chamaecyparis, Cedrus, Larix, Picea и Pseudotsuga.
Признаки поражения B. xylophilus неспецифичны. Одним из самых ранних симптомов болезни хвойного увядания является уменьшение или прекращение выделения живицы из искусственных ран, сделанных на стволах деревьев. Другим симптомом является пожелтение и увядание хвои, частичное или полное высыхание кроны, ведущее к возможной гибели растения-хозяина. У некоторых деревьев заражение B. xylophilus не приводит к появлению выраженных симптомов.
Распространение B. xylophilus на большие расстояния связано с деятельностью человека: транспортировка зараженной необработанной древесины, с инфицированными ветками и саженцами растений и др. Естественный способ перемещения B. xylophilus от одного дерева к другому происходит при помощи жуков-усачей рода Monochamus. Заражение может происходить во время питания имаго на здоровых растениях (первичная передача) или при откладывании яиц самкой переносчика на порубочные остатки, ветви, недавно погибшие, или ослабленные деревья (вторичная передача) (Naves et al., 2016). Проникая через ранки, создаваемые жуками, нематоды быстро размножаются и мигрируют по сосудистой системе, проникая в проводящие сосуды, обеспечивающие циркуляцию воды и минеральных веществ, и питаются паренхимой и эпителиальными клетками смоляных каналов.
«ФИТОСКРИН» — технология быстрой молекулярно-генетической диагностики заболеваний растений методом ПЦР в реальном времени
«Bursaphelenchus xylophilus-РВ»
Набор реагентов для выявления ДНК сосновой нематоды методом полимеразной цепной реакции в реальном времени.
Набор может быть использован в лабораторных центрах и институтах, проводящих контроль фитосанитарного состояния растений, в том числе посадочного материала в целях обнаружения Bursaphelenchus xylophilus. Набор позволяет качественно определить, содержится ли в образце ДНК Bursaphelenchus xylophilus.
Набор реагентов «Bursaphelenchus xylophilus-РВ» позволяет одновременно выявлять в одной реакционной смеси специфичный фрагмент ДНК Bursaphelenchus xylophilus – по каналу флуоресценции R6G/HEX/Yellow/VIC, а также внутренний положительный контроль (ВПК) – по каналу флуоресценции Cy5/Red. Реакция ВПК необходима для исключения ложноотрицательных результатов.
- Специфичность
Специфичность – ложноотрицательные результаты при анализе образцов, содержащих ДНК целевого объекта, отсутствовали, ложноположительные результаты при анализе образцов ДНК, не содержащих вышеперечисленные специфические фрагменты, отсутствовали.
Набор реагентов апробирован на следующих приборах: «АНК-32 (32М, 48)» (ИАП РАН, г. Санкт-Петербург, Россия), «CFX96» («BioRad», США), «Rotor Gene» (Qiagen), «DT» («ДНК-технология», Россия), QuantStudio 5 (Thermo Fisher Scientific, США).
