Набор реагентов «Ditylenchus destructor - РВ»

кат. № PH-103

Ditylenchus destructor Thorne, 1945, или стеблевая нематода картофеля – патоген, поражающий свыше 100 видов растений, и широко распространенный в странах Африки, Северной и Южной Америки, Азии, Европы и Океании. В России нематода встречается на западе страны, центральных регионах, в Сибири и на Кавказе.

Основным растением-хозяином стеблевой нематоды является картофель (Solanum tuberosum), также к числу восприимчивых растений относятся большое количество сельскохозяйственных и декоративных культур: Humulus lupulus, Dahlia spp, Tulipa spp, Gladiolus spp, Taraxacum officinale, Iris spp. При отсутствии растения-хозяина D.destructor способен размножаться на мицелии некоторых видов грибов. Нематода сохраняется в почве, сорняках и растительных остатках, остается жизнеспособной при низких температурах и в условиях засухи.

В большинстве случаев D. destructor поражает подземные части растений, иногда проникает в основание стебля и надземные части. Общие для всех растений признаки заражения стеблевой нематодой: изменение цвета, карликовость, скручивание листьев, деформация для надземных частей, изменение цвета, некроз и гниение для подземных частей (луковицы, клубни). Инфицирование картофеля характеризуется продолжительным бессимптомным периодом. Признаки заражения проявляются на этапах уборки или хранения клубней (слегка вдавленные серовато-бурые или свинцовых пятна). Пораженные D.destructor клубни картофеля изменяют цвет, отмечается гниение тканей, кроме того растение становится уязвимым к вторичному заражению другими фитопатогенными организмами.

«Ditylenchus destructor - РВ»

Набор реагентов для выявления ДНК стеблевой нематоды картофеля методом полимеразной цепной реакции в реальном времени

Набор может быть использован в лабораторных центрах и институтах, проводящих контроль фитосанитарного состояния растений, в том числе посадочного материала в целях обнаружения Ditylenchus destructor. Набор позволяет качественно определить, содержится ли в образце ДНК Ditylenchus destructor.

Набор реагентов «Ditylenchus destructor - РВ» позволяет одновременно выявлять в одной реакционной смеси специфичный фрагмент ДНК Ditylenchus destructor – по каналу флуоресценции FAM/Green, а также внутренний положительный контроль (ВПК) – по каналу флуоресценции HEX/Yellow. Реакция ВПК необходима для исключения ложноотрицательных результатов.

• Чувствительность

  Чувствительность ПЦР при использовании набора реагентов «Ditylenchus destructor - РВ» не менее 1,0*103 копий ДНК в миллилитре пробы.

• Специфичность

  Специфичность – ложноотрицательные результаты при анализе образцов, содержащих ДНК целевого объекта, отсутствовали, ложноположительные результаты при анализе образцов ДНК, не содержащих вышеперечисленные специфические фрагменты, отсутствовали.

Набор реагентов апробирован на следующих приборах: «АНК-32 (32М, 48)» (ИАП РАН, г. Санкт-Петербург, Россия), «CFX96» («BioRad», США), «Rotor Gene» (Qiagen), «DT» («ДНК-технология», Россия), QuantStudio 5 (Thermo Fisher Scientific, США), Gentier 96Е (Tianlong, Китай).

Примеры анализа на выявление ДНК стеблевой нематоды картофеля с использованием набора реагентов «Ditylenchus destructor - РВ» на приборах для ПЦР в реальном времени:

АНК-48

CFX96

DTprime

Rotor-Gene Q

QuantStudio 5

Gentier 96Е